Volver a lo básico: sistemas de expresión de proteínas y pBR322 en E. coli

La amplia variedad de sistemas de expresión basados en plásmidos en E. coli resultó del hecho de que no existe una estrategia única para lograr la máxima expresión de cada gen clonado. Aunque se han implementado una serie de estrategias para hacer frente a los problemas asociados con la transcripción y traducción de genes, el plegamiento de proteínas, la secreción, la ubicación, las modificaciones postraduccionales, las particularidades de diferentes cepas y procesos similares, y se han desarrollado procesos más integrados, los elementos básicos transmitidos por plásmidos y su interacción con la cepa huésped en particular influirán en el sistema de expresión general y la productividad final. El vector plásmido pBR322 es un vector de clonación multipropósito bien establecido en laboratorios de todo el mundo, y se han creado un gran número de derivados para aplicaciones específicas y fines de investigación, incluida la expresión génica en su huésped natural, E. coli, y pocas otras bacterias. La caracterización temprana de la molécula, incluida su secuencia de nucleótidos, los mecanismos de replicación y mantenimiento, y la determinación de sus regiones codificantes, explicaron su éxito, no solo como vector de clonación universal, sino también como proveedor de genes y origen de replicación para otros vectores intraespecies. Desde la publicación de las revisiones mencionadas, han aparecido en la literatura nuevos descubrimientos relacionados con estos temas que profundizan la comprensión de las características, el comportamiento y el impacto del plásmido en los sistemas de expresión génica, así como algunas características importantes de la cepa que afectan la replicación y la estabilidad del plásmido. Los objetivos de esta revisión incluyen actualizar y discutir la nueva información sobre (1) la replicación y el mantenimiento de pBR322; (2) los mecanismos de modulación relacionados con el host de la replicación de plásmidos; (3) los efectos de la tasa de crecimiento en el control de la replicación, la estabilidad y la expresión génica recombinante; (4) formas de amplificación y eliminación de plásmidos. Finalmente, (5) se presenta un resumen de nuevos estudios auxiliares sobre pBR322.

Deja una respuesta

Tu dirección de correo electrónico no será publicada.